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        生物資訊

        細胞培養,讓康寧KBM581培養基帶你飛

        作者:admin 來源:本站 發布時間: 2017-01-06 18:35  瀏覽次數:
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        很多細胞治療領域的小伙伴提起康寧KBM581培養基并不陌生。在CIK培養過程中,581以高細胞擴增倍數、突出的細胞表型和出色的殺傷活力在眾多無血清培養基中脫穎而出。甚至在NK的培養過程中,581也表現優異,不僅可以促進細胞因子和抗體活化的NK細胞高效擴增,對于飼養層細胞支持的NK細胞培養也效果顯著。小編今天要跟大家分享的是,581還能支持T細胞,尤其是如今在細胞治療領域大熱的CAR-T細胞培養,即使在完全無血清條件下,足夠的CAR-T細胞數量可以滿足,其表型也能支持目前臨床試驗的需求。


        以下的數據來源于國內知名CAR-T細胞治療企業的臨床試驗。


        研究人員首先對比了包括KBM581在內的不同品牌的5種無血清培養基在化療病人血液樣本制備CAR-T細胞中的效果。B-ALL病人在采血前不久接受了化療,分離到PBMC后,用T細胞分選試劑盒進行T細胞分選,然后用CD3/CD28磁珠活化,同時加入IL-2進行細胞培養;培養第3天,用連接有CD19-CAR基因的慢病毒載體轉導細胞,繼續培養到第14天。與其它商品化的淋巴細胞培養基相比,581和另一品牌產品Competitor1Competitor1Competitor2都被認為是最經典的淋巴細胞培養基)獲得了最高的擴增效率(8倍,Figure1a)。細胞表型檢測結果顯示581Competitor1T細胞純度、CTL比例都符合該實驗室要求。CD8+CTL比例都超過80%,提示較高的殺傷活性。



        figure 1a

         


        figure 1b

        Figure1 不同品牌培養基培養CAR-T細胞擴增倍數和細胞表型比較


        隨后研究人員比較了581Competitor1在普通未接受放、化療B-ALL病人樣本中,CAR-T細胞的擴增情況。用同樣的分離、刺激和培養方法擴增11天,581體系中CAR-T細胞擴增42.8倍,高于Competitor140.5倍,生長曲線顯示581具有推遲的對數生長期和更高的擴增潛能(Figure2,由于回輸的需要,細胞未繼續擴增)。在其他B-ALL病人和健康人樣本中,研究人員也獲得了相似的結果。

         

        figure 2


         

        另一個國內著名CAR-T細胞研發企業對581Competitor2 的對比實驗發現,581Competitor2培養的CAR-T細胞擴增倍數、細胞活率及表型(CD3/CD4/CD8亞群比例,Tn/Tcm/Tem亞群比例,PD-1+細胞比例等)方面沒有顯著差異,二者都可以支持T細胞尤其是CAR-T細胞的高效擴增。


        綜上,581作為一種營養豐富的無血清培養基,不僅適合CIK、NK細胞的培養,也適用于T細胞,尤其是CAR-T細胞的擴增,是目前細胞治療臨床試驗和研究的最優選擇。


         

         

         

         

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